Trong dung dịch, amino acid tồn tại ở dạng ion lưỡng cực, cation hay anion tùy thuộc vào pH của dung dịch. Giá trị pH mà tại đó nồng độ dạng ion lưỡng cực đạt giá trị lớn nhất gọi là điểm đẳn



a). Dạng ion lưỡng cực Ala (2) nằm giữa pKa1 và pKa2 nên Ala có:
p I = ( 2 , 3 5 + 9 , 8 7 ) 2 = 6 , 1 1 .
Dạng ion lưỡng cực Lys (3) nằm giữa pKa2 và pKa3 nên Lys có:
p I = ( 8 , 9 5 + 1 0 , 5 3 ) 2 = 9 , 7 4 .
Dạng ion lưỡng cực Asp (2) nằm giữa pKa1 và pKa2 nên Asp có:
p I = ( 2 , 1 0 + 3 , 8 6 ) 2 = 2 , 9 8 .
b). Công thức dạng ion lưỡng cực tại điểm đẳng điện: Dạng Ala (2), Lys (3) và Asp (2) trong hình trên.
c). Ở pH = 1, dạng ion chủ yếu là Ala (1), Lys (1) và Asp (1).
Ở pH = 13, dạng ion chủ yếu là Ala (3), Lys (4) và Asp (4).
d). Ở pH = 5,97 ≈ pI của Ala nên Ala tồn tại chủ yếu ở dạng Ala (2) và không bị di chuyển trong điện trường.
pH = 5,97 > pI của Asp nên Asp tồn tại chủ yếu ở các dạng mang điện âm (Asp (3) và Asp (4)) và di chuyển về phía cực dương trong điện trường.
Vậy có thể tách Ala và Asp bằng phương pháp điện di ở pH = 5,97.