pUC18 là một plasmid nhân tạo được sử dụng làm vector chuyển gene vào tế bào vi khuẩn.

pUC18 là một plasmid nhân tạo được sử dụng làm vector chuyển gene vào tế bào vi khuẩn.

Trong đó chứa gene amp^R ( kháng lại kháng sinh ampcillin), gene lacZ ^‘ kèm promotor của operon lac( gene này chỉ mã hóa đoạn α-peptide của enzyme β-galactosidase), vị trí khởi đầu sao chép Ori và vùng chứa nhiều vị trí cắt của enzyme cắt giới hạn(MCS) như PstI,EcoRI,….( hình chiếc kéo). Khi enzyme cắt mở vòng plasmid ở vùng MCS, gene lacZ ^‘ bị chia đôi và gene cần chuyển sau đó sẽ được gắn vào vị trí này nhờ enzyme nối ligase, điều này cũng làm gene lacZ bị mất chức năng.Người ta sử dụng plasmid trên dùng làm thể truyền tạo DNA tái tổ hợp với gene pdc mã hóa enzyme sản xuất ethanol.

Chủng nhận vector tái tổ hợp chủng E.coli mang đột biến lacZ∆M15( mất đoạn mã hóa đoạn α-peptide của enzyme β-galactosidase). Nếu gene lacZ ^‘  còn chức năng thì sẽ có thể bổ sung cho gene lacZ∆M15 để tạo enzyme  β-galactosidase hoàn chỉnh. Quy trình nỳ tóm tắt như hình trên. Để nhận biết dòng vi khuẩn chuyển gene thành công, các nhà khoa học thêm vào môi trường nuôi cấy các hợp chất có hoạt tính sau:

Chất	Hoạt tính
IPTG	Chất cảm ứng tổng hợp β-galactosidase bằng cách ức chế protein lacI
X-gal	Chất nền không màu , khi bị thủy phân bởi β-galactosidase sẽ tạo ra sản phẩm màu xanh dương
Ampicillin	Ức chế tổng hợp thành tế bào vi khuẩn

Khuẩn lạc E.coli mọc trên đĩa petri có thể là màu trắng hoặc xanh dương ( màu của X-gar bị thủy phân)

Từ thông tin cung cấp mỗi phát biểu sau đây đúng hay sai?