Hãy vẽ sơ đồ phác thảo ba bước của một quy trình công nghệ

Trả lời:

• Sơ đồ ba bước của quy trình công nghệ gene :

• Ví dụ: Nhân dòng và biểu hiện gene HGH của người trong tế bào E. coli:

- Phân lập gene HGH từ tế bào người:

+ Tách chiết mRNA từ tế bào người.

+ Sử dụng kĩ thuật RT - PCR, dùng cặp mồi đặc hiệu của gene HGH để tạo và nhân bản cDNA.

- Cài cDNA vào plasmid:

+ Xử lí plasmid và cDNA bằng cùng một loại enzyme cắt giới hạn để tạo đầu dính phù hợp.

+ Trộn cDNA với plasmid, bổ sung ligase để gene HGH nối vào plasmid, tạo ra DNA tái tổ hợp.

- Đưa vector vào tế bào nhận:

+ Dung dịch DNA tái tổ hợp được trộn với tế bào E. coli, tạo các điều kiện để DNA tái tổ hợp được biến nạp vào tế bào vi khuẩn.

+ Chọn lọc tế bào chứa DNA tái tổ hợp, tách và nuôi thành dòng tế bào.

• Mục đích chuyển gene HGH của người vào tế bào vi khuẩn là để tạo ra lượng lớn hormone GH phục vụ cho các mục đích khác nhau, ví dụ: tiêm cho người bị lùn bẩm sinh do thiếu GH.