Dựa vào kiến thức đã học, hãy trình bày quy trình các bước
Giải thích
Trả lời:
Quy trình các bước cần phải làm để tạo ra được vi khuẩn chuyển gene có thể sản sinh ra hormone sinh trưởng của người (HGH):
- Phân lập gene HGH từ tế bào người:
+ Tách chiết mRNA từ tế bào người.
+ Sử dụng kĩ thuật RT - PCR, dùng cặp mồi đặc hiệu của gene HGH để tạo và nhân bản cDNA.
- Cài cDNA vào plasmid:
+ Xử lí plasmid và cDNA bằng cùng một loại enzyme cắt giới hạn để tạo đầu dính phù hợp.
+ Trộn cDNA với plasmid, bổ sung ligase để gene HGH nối vào plasmid, tạo ra DNA tái tổ hợp.
- Đưa vector vào tế bào nhận:
+ Dung dịch DNA tái tổ hợp được trộn với tế bào E. coli, tạo các điều kiện để DNA tái tổ hợp được biến nạp vào tế bào vi khuẩn.
+ Chọn lọc tế bào chứa DNA tái tổ hợp, tách và nuôi thành dòng tế bào, thu protein HGH.