Để phân tích bản đồ giới hạn của một phân tử DNA, người ta đã tiến hành phản ứng cắt với từng enzim riêng rẽ và mỗi cặp kết hợp

14/49

Để phân tích bản đồ giới hạn của một phân tử DNA, người ta đã tiến hành phản ứng cắt với từng enzim riêng rẽ và mỗi cặp kết hợp. Sau phản ứng, sản phẩm cắt được phân tích trên điện di agarose. Kết quả điện di được biểu diễn ở hình bên. Trong hình, mẫu P₀ là mẫu đối chứng (chưa bị cắt bởi enzim); mẫu E được cắt bởi enzim EcoRI; mẫu B được cắt bởi enzim BamHI; mẫu X được cắt bởi enzim XhoI; mẫu E+X và mẫu B+X là các mẫu được cắt đồng thời bởi từng cặp enzim trong một đệm đồng nhất; mẫu M là thang chuẩn kích thước 1,0kb. Hãy cho biết nhận định sau đây Đúng hay Sai?

a, Phân tử DNA này có dạng mạch thẳng.

ĐúngSai

b, Kích thước của đoạn DNA này là 7kb.

ĐúngSai

c, BamHI có 2 vị trí cắt và và XhoI có 1 vị trí cắt.

ĐúngSai

d, Vị trí cắt giới hạn của EcoRI cách vị trí cắt giới hạn của XhoI 2,0kb, vị trí cắt giới hạn của BamHI cách vị trí cắt giới hạn của XhoI lần lượt là 4,5kb và 1,5kb.

ĐúngSai

Giải thích

a	Phân tử DNA này có dạng mạch thẳng.		S
b	Kích thước của đoạn DNA này là 7kb.	Đ
c	BamHIcó 2 vị trí cắt và và XhoI có 1 vị trí cắt.	Đ
d	Vị trí cắt giới hạn của EcoRI cách vị trí cắt giới hạn của XhoI 2,0kb, vị trí cắt giới hạn của BamHI cách vị trí cắt giới hạn của XhoI lần lượt là 4,5kb và 1,5kb.	Đ

a) Quan sát kết quả điện di ta thấy: mẫu P0 mặc dù chưa bị cắt bởi enzim nhưng khi chạy điện di thu được 2 đoạn có kích thước khác nhau, chứng tỏ đây là DNA mạch vònga sai.

Khi cắt bằng EcoRI hoặc XhoI thì khi chạy điện di đều thu được một đoạn duy nhất, do đó phân tử DNA này dạng mạch vòng, vì nếu dạng mạch thẳng thì khi cắt bằng enzim giới hạn thu được 2 đoạn khác nhau).

b)đúng. Kích thước của đoạn DNA chính bằng kích thước của đoạn cắt bởi enzim có một vị trí cắt – EcoRI hoặc XhoI. Do vậy kích thước của đoạn DNA này là 7kb.

c) đúng→ BamHI và XhoI lần lượt 2 và 1 vị trí cắt , Đối với BamHI thu được 2 đoạn trong đó kích thước đoạn nhỏ chính là khoảng cách giữa 2 vị trí cắt, bằng 1,0kb.

d) đúng- Dựa vào mẫu E + X suy ra vị trí cắt giới hạn của EcoRI cách vị trí cắt giới hạn của XhoI 2,0kb.

- Dựa vào mẫu B + X suy ra 2 vị trí cắt giới hạn của BamHI cách vị trí cắt giới hạn của XhoI lần lượt là 4,5kb và 1,5kb.