Bước quan trọng nhất trong việc xây dựng khóa lưỡng phân là

Xác định đặc điểm đặc trưng của mỗi đại diện sinh vật trong năm giới.

Dựa vào một đôi đặc điểm đối lập phân chia sinh vật thành hai nhóm.

Tiếp tục phân chia các nhóm trên thành hai cho đến khi mỗi nhóm chỉ còn một sinh vật.

Vẽ sơ đồ khóa lưỡng phân.